用合適的濾光片捕獲熒光信號，濾光片可幫助您在成像時控制光學(xué)，將濾光片組放在熒光顯微鏡的不同點(diǎn)上，即可設(shè)定激發(fā)樣品的光線波長，以及在熒光發(fā)射時檢測到的波長。

為何熒光顯微鏡需要使用濾光片？

就熒光顯微鏡而言，激發(fā)濾光片，二向色鏡以及發(fā)射濾光片通常包含在同一立方體內(nèi)，通常被設(shè)計來匹配特定熒光團(tuán)或熒光蛋白的光譜。偶爾情況下，濾光片也可能不在立方體內(nèi)，但會安裝在一個轉(zhuǎn)輪（稱為濾光片轉(zhuǎn)盤）上。濾光片輪盤您可以混合搭配，盡可能匹配所需要的激發(fā)和發(fā)射波長。其終極目標(biāo)是捕獲到您希望從結(jié)合靶標(biāo)的熒光基團(tuán)光束上捕獲的光信號，同時漏過系統(tǒng)其它部分的任何光線（環(huán)境光，激發(fā)光源等）。我們在這里提到的出現(xiàn)在檢測儀上不想要的光線稱為背景熒光。

熒光成像使用的濾光片有哪些類型呢？

通常情況下，濾光片組被設(shè)計成可用于捕獲制定熒光團(tuán)的最大激發(fā)和發(fā)射波長，但不會捕獲所有的熒光。多數(shù)現(xiàn)代化濾光片組的設(shè)計旨在確保激發(fā)濾光片允許制定波長區(qū)間的光線通過。這種類型的濾光片稱為帶通濾光片。帶通濾光片通常通過中間波長和區(qū)間寬度確定。在較為簡單的熒光顯微鏡裝置中，一旦激發(fā)光線離開激發(fā)濾光片，即會照射到靶標(biāo)上，靶標(biāo)上的熒光激團(tuán)隨即變?yōu)榧ぐl(fā)狀態(tài)，然后發(fā)射向光譜的紅外端（相對于激發(fā)光線）遷移的光線，并非所有此類發(fā)射光線都會被檢測器捕獲到——僅哪些允許通過二向色鏡且能通過發(fā)射濾光片的光線。發(fā)射濾光片通常為帶通濾光片或者長波通濾光片，具體取決于特定的熒光團(tuán)和成像實(shí)驗(yàn)。如果您希望讓超過特定波長的光線通過檢測器，可選擇長波通濾光片。